Химическая CLICK-функционализация рекомбинантных белков ... on Proteins - Chemical CLICK-functionalization of recombinant proteins
|
 |
КЛИК-функционализированный NHS эфир или Малеимиды позволяют встраивать Азид-, Алкин-, DBCO-, Тетразин- или trans-Циклооктен- группы в рекомбинантные белки. Модифицируются лизиновая группа (NHS эфирное или Амино-мечение) или цистеиновая группа (Малеимидно-Тиоловое мечения) (Таблица. 1).
В целом, Тиоловое мечения более спецефично, чем Амино-мечение, вследствие относительно низкой встречаемости цистеина по сравнению с лизином. Однаку поскольку встречаемость цистеина и лизина варьирует среди различных белков, при выборе стратегии мечения необходимо проанализировать аминокислотную последовательность и третичную структура целевого белка.
Итоговый случайным образом КЛИК-функционализированный белок может быть впоследствии обработан в Cu(I)-катализируемой (азид-алкиновой) или не использующей медь (азид-DBCO /тетразин/TCO) клик-реакции, дающей возможность:
Jena Bioscience предлагает набор NHS эфира и Малеимидов для КЛИК-функционализации белков в не использующей медь или Cu(I)-катализируемой реакции соответственно. Ряд реагентов с разной растворимостью (PEG- и Сульфо-линкер для увеличения молекулярной растворимости) и UV-Vis прослеживаемая детекция эффективности мечения (UV-TracerTM варианты) помогут подобрать метод, подходящий под конкретные задачи
В целом, Тиоловое мечения более спецефично, чем Амино-мечение, вследствие относительно низкой встречаемости цистеина по сравнению с лизином. Однаку поскольку встречаемость цистеина и лизина варьирует среди различных белков, при выборе стратегии мечения необходимо проанализировать аминокислотную последовательность и третичную структура целевого белка.
Итоговый случайным образом КЛИК-функционализированный белок может быть впоследствии обработан в Cu(I)-катализируемой (азид-алкиновой) или не использующей медь (азид-DBCO /тетразин/TCO) клик-реакции, дающей возможность:
- встроить Биотиновую группу для последующей очистки (используя Азид-Биотиновые, Алкин-Биотиновые or DBCO-содержащие биотинилирующие реагенты)
- для встраивания флуоресцентной группы для последующей визуализации (используя флуоресцентные Азиды, флуоресцентные Алкины, DBCO-содержащие флуоресцентные красители or Тетразин-содержащие флуоресцентные красители)
- для связывания белков к комплементарным КЛИК-функционализированным биомолекулам, например, ДНК
Jena Bioscience предлагает набор NHS эфира и Малеимидов для КЛИК-функционализации белков в не использующей медь или Cu(I)-катализируемой реакции соответственно. Ряд реагентов с разной растворимостью (PEG- и Сульфо-линкер для увеличения молекулярной растворимости) и UV-Vis прослеживаемая детекция эффективности мечения (UV-TracerTM варианты) помогут подобрать метод, подходящий под конкретные задачи
Таблица 1 Клик-функционализированные NHS эфиры и Малеимиды для Амино- и Тиол- мечения, соответственно.
| Реакционная группа | NHS эфир | Малеимид |
| Азид | Азид-PEG4-NHS ester Азид-PEG8-NHS эфир Азид-PEG12-NHS эфир UV-TracerTMАзидо-NHS эфир | Азид-PEG3-Малеимид |
| Алкин | Пропаргил-NHS эфир Ацетилен-PEG4-NHS эфир | Пропаргил-Малеимид Ацетилен-PEG4-Малеимид |
| DBCO | DBCO-NHS эфир DBCO-PEG4-NHS ester DBCO-PEG-Sulfo-NHS эфир | DBCO-Малеимид DBCO-PEG4-Малеимид |
| Тетразин | 6-Метил-Тетразин-PEG5-NHS эфир | 6-Метил-Тетразин-PEG4-Малеимид |
| Транс--Циклооктен (TCO) | TCO-NHS эфир TCO-PEG4-NHS эфир UV-TracerTM TCO-NHS эфир | TCO-PEG3-Малеимид |
| |||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||
Datasheet
| |||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||
| ||||||||||||
| ||||||||||||
Информация представлена исключительно в ознакомительных целях и ни при каких условиях не является публичной офертой
