Амин-модифицированные нуклеотиды ферментативно встраиваются в ДНК/кДНК вместо их естественных аналогов (Таблица 1). Получившиеся молекулы
Амин-функционализированной ДНК могут быть затем помечены с помощью классической Амин/NHS эфир реакции , что дает возможность
Чтобы обеспечить оптимальные свойства субстрата, ядро наших модифицированных нуклеотидов является производным естественых аналогов с соответствующей реакционной группой, присоединенной через оптимизированный линкер в одной из благоприятных позиций (например, цитидин/уридин C-5).
ПЦР: Полимеразная цепная реакция с
Taq полимеразой (CLK-T09, NU-1705) или полимеразами семейства B Pwo, Deep Vent
exo- и KOD XL (CLK-T05/-T06/-T07);
NT: Ник-трансляция с ДНКазой I / ДНК-полимеразой I;
Элонгация праймера: Удлинение праймера полимеразами семейства B Pwo, Deep Vent
exo- и KOD XL;
3'-концевое мечение: включение Терминальной деоксинуклеотидил Трансферазой (TdT);
RT:: Обратная транскрипция с обратной транскриптазой вируса мышиного лейкоза Молони (MMLV RT)
1: собственное тестирование | 2: внешние данные (см. руководство) | n/a: нет информации | - : неприменимо |