1. Каталог >
  2. Реактивы >
  3. Методы >
  4. Клонирование и мутагенез >

Наборы для неспецифического мутагенеза

Random Mutagenesis Kits

Набор для мутагенеза
Молекулярная эволюция: Случайный мутагенез

  • Три готовых к работе набора для случайного мутагенеза нужного гена
  • Сопровождается детальной инструкцией и справочной информацией
В течение трех миллиардов лет эволюции природа подготовила множество белков, просто повторяя цикл из случайного мутагенеза и последующим in vivoотбором. Этот пример естественной эволюции направил исследователей на разработку стратегий in vitro пермутаций генов и белков. Среди различных стратегий появились три мощных метода:

Мутагенез с помощью dNTP аналогов
Метод обеспечивает мутагенность до 20% и основан на включении мутагенных аналогов dNTP в амплифицируемый фрагмент ДНК. Аналог устраняется в процессе второй ПЦР в присутствии четырех естественных dNTP, оставляя высокомутантную ДНК, готовую для дальнейшего исследования.

Мутагенез с помощью ненадежной ПЦР
Мутагенез осуществляется при ПЦР-реакции в измененных условиях, которые вызывают повышенную частоту ошибок ДНК-полимеразы. Просто запустите ПЦР-протокол, указанный в руководстве, для достижения мутагенности в районе 0.6-2.0% в одной ПЦР-реакции!

Мутагенез с помощью перестановок ДНК (шаффлинг)
При шаффлинге ДНК генерируют библиотеки случайно фрагментированного гена или набора связанных генов с последующей сборкой фрагментов в само-инициируемой (self-priming) ПЦР-реакции. Мутагенность аналогична ненадежной ПЦР, но ДНК-шаффлинг позволяет рекомбинацию последовательностей из разных, родственных генов.



Datasheet
НазваниеКодЦена Количество
Kit PP-103 по запросу 15 reactions
Хранить при -20°C, избегать частого оттаивания и замораживания

ДНКаза I
10x буфер для расщепления
DNase stop solution
Полимераза
10x буфер для перемешивания
Смесь dNTP
Вода для ПЦР
JBS DNA-Shuffling Kit разработан для генерирования библиотек генов случайной фрагментацией одного гена или набора родственных генов. За контролируемой фрагментацией ДНК следует случайное воссоединение в самоинициируемой (праймерами выступают сами фрагменты) ПЦР-реакции. Этот метод позволяет рекомбинацию последовательностей из различных родственных генов. В целом, уровень мутагенеза составляет приблизительно 0.7%.



Datasheet
НазваниеКодЦена Количество
Kit PP-101 по запросу 15 reactions
Хранить при -20°C, избегать частого оттаивания и замораживания

Полимераза
10x буфер для мутагенеза
Смесь dNTP
dPTP
8-oxo-dGTP
Вода для ПЦР
JBS dNTP-Mutagenesis Kit основан на внедрении мутагенных dNTP аналогов 8-oxo-dGTP и dPTP в амплифицируемый ДНК фрагмент в процессе ПЦР, Мутагенные dNTP устраняются на этапе второй ПЦР, проводимой в присутствии только четырех естественных dNTP, в результате чего уровень мутагенеза достигает 20%.



Datasheet
НазваниеКодЦена Количество
Kit PP-102 по запросу 15 reactions
Хранить при -20°C, избегать частого оттаивания и замораживания

Полимераза
10x буфер для реакции
10x Error-prone solution
dNTP error-prone mix
Вода для ПЦР
JBS набор для подверженной ошибкам ПЦР внедряет мутации в нужный ген, используя измененные условия ПЦР-реакции. Увеличение концентрации MgCl2, добавление MnCl2 и несблансированное соотношение dNTP провоцирует увеличение степени ошибочности ДНК-полимеразы. Уровень мутагенеза, достигаемый использованием подверженной ошибкам ПЦР находится в диапазоне 0.6-2.0%.




Информация представлена исключительно в ознакомительных целях и ни при каких условиях не является публичной офертой