1. Каталог >
  2. Реактивы >
  3. Виды реактивов >
  4. Нуклеозиды, Нуклеотиды и их аналоги >
  5. Нуклеотиды >
  6. Нуклеотиды по применению >
  7. ДНК >

Мутагенез

Nucleotides by Application  /  ... on DNA - Mutagenesis

Неспецифический (случайный) мутагенез - обычный подход для направленной эволюции белков и для анализа функционально-структурных отношений белка. В отличие от сайт-направленного подхода, неспецифический мутагенез является перспективным инструментом для идентификации полезных мутаций без предварительной структурной и функциональной информации о белке. Случайным образом внедренные мутации ДНК такие, как замена нуклеотидов (замещение), вставка или делеция одного или нескольких нуклеотидов приводит к изменению аминокислотной последовательности, таким образом генерируя белки с измененными характеристиками - например, увеличенной или уменьшенной активностью.

Вы можете также ознакомиться с разделом: Наборы для неспецифического мутагенеза

Мощным инструментом для неспецифического мутагенеза является ПЦР со включением мутагенных нуклеотидных аналогов в ДНК фрагменты[1-7]. Мутагенный потенциал этих нуклеотидных аналогов зависит от их измененной способности связывания с нуклеотидными основаниями, которые ведут к образованию нескольких мутаций во множественных раундах ПЦР (Таб. 1). Элиминация модифицированных аналогов достигается второй ПЦР в присутствии только четырех натуральных dNTP, оставляя высокомутантный ДНК, готовый для дальнейшего исследования.


Таблица 1: Выбор нуклеотидов для применения в неспецифическом мутагенезе.

Taq: Thermus aquaticus; транзиция: замена пурина на пурин (A ↔ G) или пиримидина на пиримидин (C ↔ T); трансверсия: замена пурина на пиримидин или наоборот(C/T ↔ A/G).
НуклеотидМетод внедренияОсновной тип мутацииПервоочередно индуцируемые мутацииСсылка
8-Oxo-dGTPПЦР (Taq Pol)ТрансверсияA:T → C:G и T:A → G:C[1]
Сочетание подверженной ошибкам ПЦР(Mn2+) и ПЦР (Taq Pol) with 8-Oxo-dGTPТрансверсия
Транзиция
A:T → T:A и A:T → C:G
A:T → G:C и G:C → A:T
[2]
dPTPПЦР (Taq Pol)ТранзицияA:T → G:C и G:C → A:T[1]
8-Oxo-dGTP & dPTPПЦР (Taq Pol)Трансверсия
Транзиция
Смесь мутаций, индуцированных одиночным нуклеотидом[1,3]
5Br-dUTPПЦР (Taq Pol)Трансверсия
Транзиция
A:T → G:C
T:A → C:G
[4]
2OH-dATPПЦР (Taq Pol)Трансверсия
Транзиция
A:T → C:G и G:C → T:A
A:T → G:C
[5]
dITPПЦР (Taq Pol)ТранзицияA:T → G:C и G:C → A:T[6,7,8]



Datasheet
НазваниеКодЦена Количество
L pack NU-1209L по запросу 5 x 50 Units
S pack NU-1209S по запросу 50 Units



Datasheet
НазваниеКодЦена Количество
L pack NU-122L по запросу 5 x 50 Units
S pack NU-122S по запросу 50 Units



Datasheet
НазваниеКодЦена Количество
8-Oxo-dATP NU-889S по запросу 10 μl (100 mM)
8-Oxo-dATP NU-889L по запросу 5 x 10 μl (100 mM)



Datasheet
НазваниеКодЦена Количество
L pack NU-1117L по запросу 5 x 30 Units
S pack NU-1117S по запросу 30 Units



Datasheet
НазваниеКодЦена Количество
L pack NU-1119L по запросу 5 x 30 Units
S pack NU-1119S по запросу 30 Units




Информация представлена исключительно в ознакомительных целях и ни при каких условиях не является публичной офертой