Агароза IDA для гравитационных колонок: безметаллическая, содержащая никель, цинк, кобальт, медь

Основываясь на принципе ЖМКО Пирсона (HSAB concept), связанные IDA (иминодиацетатом) ионы Cu²⁺, Ni²⁺, Zn²⁺, Co²⁺ проявляют разное сродство и специфичность к гистидинам.Медь (Cu²⁺): демонстрирует самую низкую специфичность при высоком целевом извлечении. Связывание неспецифических белков минимально при низкой металлической нагрузке. Кобальт (Co²⁺): Демонстрирует высочайшую специфичность связывания при уменьшенном связывании неспецифических белков. Целевые потери минимальны при высокой металлической загрузке. Никель (Ni²⁺) и Цинк(Zn²⁺): Демонстрируют среднюю селективность. Тогда как использование ионов Ni²⁺ является стандартным методом, IDA-связанный Zn²⁺ может оказаться предпочтительнее как связанных ионов Cu²⁺ , так и Ni²⁺ - в результате своей относительно низкой связывающей способности к клеточным белкам хозяина - E. coli^[4]. Низкая плотность металлической нагрузки увеличивает качество очистки рекомбинантных белков, но при сниженном целевом извлечении. Высокая плотность металлической нагрузки приводит к большей очистке рекомбинантных белков, однако, нежелательные белки в образце также будут связаны.