Трансляционное мечение белка Reporter Protein-based Labeling - dC-Puromycin-based Fluorescent & Biotin Protein Labeling
|
 |
Меченые dC-Пуромицин конъюгаты для специфического мечения C-конца белков in vitro
 |
Антибиотик пуромицин является структурным аналогом аминоацил-тРНК, который традиционно используется как ингибитор белкового синтеза, поскольку он специфически встраивается в C-конец синтезируемой полипептидной цепи, останавливая трансляцию. Основываясь на этом наблюдении был разработан новый и значительно более быстрый метод:
C-концевое мечение неспроцессированных белков может быть осуществлено приin vitro трансляции в присутствии низкой концентрации меченых dC-пуромицин конъюгатов[1].
Эти белки могут быть успешно использованы для анализа белок-белковых взаимодействий (pull-down анализ, FCCS, белок-белковые микрочипы) и ДНК-белковых взаимодействий (ДНК микрочипы)[2,3,4].
В отличие от традиционно применяемых подходов пост-трансляционного мечения, можно избежать дополнительной трудоемкой стадии очистки вследствие синхронизации синтеза белка и его мечения.
Литература:
[1] Miyamoto-Sato et al. (2000) Specific bonding of puromycin to full-length protein at the C-terminus. Nucleic Acids Res. 28(5):1176.
[2] Nemoto et al. (1999) Fluorescence labeling of the C-terminus of proteins with a puromycin analogue in cell-free translation systems. FEBS Letters 462:43.
[3] Doi et al. (2002) Novel Fluorescence Labeling and High-Throughput Assay Technologies for In Vitro Analysis of Protein Interactions. Genome Research 12:487.
[4] Kawahashi et al. (2007) High-throughput fluorescence labeling of full-length cDNA products based on a reconstituted translation system. J. Biochem. 141(1):19.
| |||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||
Datasheet
| |||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||
Информация представлена исключительно в ознакомительных целях и ни при каких условиях не является публичной офертой
