Нуклеозиды - маркеры рака и пролиферации Nucleosides sorted by special application - Cancer and Proliferation Marker Nucleosides
|
 |
Маркерные нуклеозиды - такие, как 1-Метил-аденозин, 5-Метил-уридин, N3-метил-уридин и Псевдоуридин оказываются повышены в связи с раком [1], [2], [3]. Мы предлагаем подходящие стандарты нуклеозидов для их измерения.
Определение de novo ДНК синтеза или синтеза в S-фазе проводится с модифицированными нуклеозидами, которые эффективно встраиваются в делящиеся клетки и впоследствие маркируются. Br-dU может быть маркирован соответсвтующим антителом [4], [5], [6]. 5-EdU будет делать вновь синтезированную ДНК когда клетка инкубируется с флуоресцентным азидом, напрямую соединяясь в "клик"-реакции с алкиновой группой 5-EdU. В отличие от Br-dU, метод не требует фиксации образца ДНК, денатурации и позволяет хорошо сохранить структуру изучаемого объекта. [7], [8]. Аналог 5-Этинил-2'-деокси-цитидина может быть использован для детекции ДНК синтеза с той же чувствительностью ,как и EdU [10].
Основываясь на том же принципе, 5-EU может быть использована для детекции транскрипции РНК ее обновления in vivo. Поскольку он встраивается в транскрипты РНК, 5-EU-меченые клеткочные РНК могут быть быстро и с высокой чувствительностью выявлены флуоресцентными азидами [9].
Литература
[1] Seidel et al. (2006) Modified nucleosides: an accurate tumour marker for clinical diagnosis of cancer, early detection and therapy control. Br J Cancer 94:1726.
[2] Bullinger et al. (2007) Metabolic signature of breast cancer cell line MCF-7: profiling of modified nucleosides via LC-IT MS coupling. BMC Biochem 29:25.
[3] Kim et al. (2001) Capillary electrophoretic profiling and pattern recognition analysis of urinary nucleosides from uterine myoma and cervical cancer patients. Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications 754:97.
[4] Gratzner et al. (1992) Monoclonal antibody to 5-bromo and 5-iododeoxyuridine: a new reagent for detection of DNA replication. Science 218:474.
[5] Qin et al. (1993) Comparison of the classical autoradiographic and the immunohistochemical methods with BrdU for measuring proliferation parameters in colon cancer. Anticancer Res 13:731.
[6] Morstyn et al. (1986) Immunohistochemical identification of proliferating cells in organ culture using bromodeoxyuridine and a monoclonal antibody. J Histochem Cytochem 34(6):697.
[7] Salic et al. (2008) A chemical method for fast and sensitive detection of DNA synthesis in vivo. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 105 (7):2415.
[8] Buck et al. (2008) Detection of S-phase cell cycle progression using 5-ethynyl-2'-deoxyuridine incorporation with click chemistry, an alternative to using 5-bromo-2'-deoxyuridine antibodies. Biotechniques 44 (7):927.
[9] Jao et al. (2009) Exploring RNA transcription and turnover in vivo by using click chemistry. Proc. Nat. Acad. Sci. USA 105 (41):15779.
[10] Qu et al. (2011) 5-Ethynyl-2'-deoxycytidine as a new agent for DNA labeling: detection of proliferating cells. Anal Biochem
417(1):112.
| ||||||||||||
| ||||||||||||
Datasheet
| ||||||||||||
| ||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||
| ||||||||||||
| |||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||
| ||||||||||||
| ||||||||||||
| ||||||||||||
| ||||||||||||
| |||||||||||||||||||
| |||||||||||||||||||
| ||||||||||||
| ||||||||||||
Информация представлена исключительно в ознакомительных целях и ни при каких условиях не является публичной офертой
