Мечение молекул (белков, нуклеиновых кислот) биотином обычно выполняется для последующей аффинной очистки в стрептавидин-агарозе или детакции
флуоресцентным или HRP-меченым стрептавидином. Из-за чрезвычайно высокого сродства биотина к стрептавидину (K
D = 10
-15 M), взаимодействие биотинилированной молекулы со стрептавидином практически необратимо в физиологических условиях.
Алкин-содержащие биотинилирующие реагенты могут затем использоваться для
мечения Азид-содержащих биомолекул в Cu(I)-катализируемой Азид-Алкин клик-реакции (CuAAC).
Доступен ряд
биотинилированных реагентов с
- улучшенными показателями растворимости и детекцией
(PEG- линкер для увеличения растворимости и связываемости со стрептавидином)- различной расслаиваимостью (cleavability) (Диазо-линкер для удаления биотиновой группы после очистки)
*DBCO также известен как ADIBO (= Азадибензоциклооктин) или DIBAC (= Дибензоазациклооктин)
Click Chemistry background information