Мечение молекул (белков, нуклеиновых кислот) биотином обычно выполняется для последующей аффинной очистки в стрептавидин-агарозе или детакции
флуоресцентным или HRP-меченым стрептавидином. Из-за чрезвычайно высокого сродства биотина к стрептавидину (K
D = 10
-15 M), взаимодействие биотинилированной молекулы со стрептавидином практически необратимо в физиологических условиях.
Дибензоциклооктин (DBCO)*-содержащие биотинилирующие реагенты могут быть использованы для мечения
Азид-меченых биомолекул в реакции безмедного азид-алкинового циклоприсоединения, облегченного напряжением (SPAAC).
Доступен ряд
биотинилированных реагентов с
- различными показателями растворимости
(PEG- и Сульфо-линкер для увеличения растворимости)- оптимизированными показателями связываемости со стрептавидином
(разная длина PEG-линкера)- различной расслаиваимостью (cleavability)
(Диазо- и Сульфидрил-линкер для удаления биотиновой группы после очистки)
*DBCO также известен как ADIBO (= Азадибензоциклооктин) или DIBAC (= Дибензоазациклооктин)
Click Chemistry background information