Ледяные кольца, наблюдаемые в дифракционных картинах быстрозамороженных белковых кристаллов возникают, в основном, при кристаллизации водного раствора, окружающего кристал, а не внутреннего растворителя. Масла могут вытеснить и заменить этот окружающий раствор с минимальным риском повреждения вследствие осмотического шока. Однако, при использовании минерального масла, Paratone и других масел с высокой вязкостью, объем окружающего масла может превышать объем кристалла в 10 и более раз, и может обладать избыточным сопротивлением, что увеличивает подвижность образца в криопотоке. LV CryoOil™ наименее вязкое из всех доступных перфторэфирных масел (1/10 от масла Paratone и сравнимо с растительным маслом), и очень низким поверхностным натяжением (менее 1/3 по сравнению с водой). Таким образом, погружение в этом масло с последующим легким постукиванием для стряхивания избытка может дать защитную пленку масла на вашем кристалле менее 10 микронов толщиной. Каждый сосуд содержит 1,5 мл. масла, достаточно для защиты сотен кристаллов. Масор NVH обладает очень высокой вязкостью и применяется для дифракционных измерений при комнатной и переменной температуре. Перемещение кристалл в процессе сбора данных минимизировано, даже когда для предотвращения дегидратации используются толстые слои. Это масло очень эффективно в удалении внешнего растворителя для предотвращения формирования ледяного кольца в процессе замораживания. Перемещайте ваш кристалл вперед-назад, переносите в свежее масло и повторяйте пока вы не увидите более следов растворителя и кристалл не станет почти невидимым. Многие кристаллы белка, подготовленные таким образом, могут быть медленно охлаждены до 100 К без значительной деградации дифракционных свойстыв, позволяя сбор данных при произвольной температуре. В отличие от масла Paratone-N, это масло не формирует дифракционных колец при охлаждении. Маленькое пятнышко Apiezon N прекрасно подходит для присоединения малых молекул к держателям mitegen, и обеспечивает улучшение теплового контакта. На смазку Apiezon N можно положиться для поддержания эффективной, без трещин, связи на длинные периоды, даже в случаях, требующих частое термоцеклирование.
Информация представлена исключительно в ознакомительных целях и ни при каких условиях не является публичной офертой |
||||||||||||||||||||||||||||||||