Набор очистки ПЦР-продукта Очистка ДНК из ПЦР-образцов на спин-колонках
|
 |
Хранить при комнатной температуре
Срок годности: 12 месяцев
Набор предназначен для обработке ПЦР-продукта (удаления праймер-димеров, праймеров, нуклеотидов, белков, солей, аагрозы, бромистого этидия и других примесей). Метод основан на технологии кремниевых мембран для связывания ДНК при высокой солености и элюции в буфер низкой солености. Набор обеспечивает простой и эффективный путь очистки линейной или кольцевидной ДНК размером от 100 п.н. до 10 тыс.п.н.и оптимизирован для работы с количествами ДНК около 20 µg. Такой метод не требует экстракции или осаждения органическими растворителями и гарантирует высокий и стабильный уровень очистки.
| Название | Код | Цена | Количество | |
| L pack | PP-201L | по запросу | 250 preparations | |
| S pack | PP-201S | по запросу | 50 preparations | |
| Sample | PP-201XS | по запросу | 10 preparations |
| Документы |
|---|
 Datasheet
|
Дополнительно необходимо (не поставляется в комплекте):
- 96-99% этиловый спирт
- Изопропанол (для пробоподготовки с высоким выходом)
- Пробирки 1,5 мл.
Состав набора:
| PP-201XS (10 реакций) |
PP-201S (50 реакций) |
PP-201L (250 реакций) |
|
| Связывающий буфер | 6 ml | 30 ml | 150 ml |
| Активационный буфер | 1,2 ml | 6 ml | 30 ml |
| Отмывочный буфер | Добавьте 12 ml этанола (итоговый объем 15 ml) | Добавьте 64 ml этанола (итоговый объем 80 ml) | Добавьте 160 ml этанола (итоговый объем 200 ml) |
| Элюционный буфер | 1 ml | 5 ml | 25 ml |
| Спин-колонки | |||
| Пробирки 2 мл. | |||
Подготовка к работе: Очистка ДНК состоит из простых процедур связывания, отмывки и элюирования. Перед началом работы требуется разбавить отмывочный буфер 96-99% этиловым спиртом, как указано на бутыли:
Дополнительно использование изопропанола рекомендовано для фрагментов меньше 200 п.н. или больше 5 тыс.п.н. Необязательной второй шаг отмывки минимизирует содержание солей в очищенном продукте, но может значительно уменьшать выход фрагментов ДНК <200 п.н.
Очистка ДНК из ПЦР-образцов
-
Подготовка пробы:
- Стандартная - для фрагментов ДНК размером от 200 п.н. до 5 тыс.п.н.:
Добавьте 5 объемов Связывающего буфера к 1 объему образца ДНК и хорошо перемешайте. К примеру, если объем вашего ДНК образца составляет 50 µl, добавьте 250 µl Связывающего буфера. - Подготовка с высоким выходом - для фрагментов ДНК размером менее 200 п.н. или более 5 тыс.п.н.:
Добавьте 3 объема Связывающего буфера и 2 объема Изопропанола к ПЦР-образцу. К примеру, если объем вашего ДНК образца составляет 50 µl, добавьте 150 µl Связывающего буфера и 100 µl Изопропанола.
- Стандартная - для фрагментов ДНК размером от 200 п.н. до 5 тыс.п.н.:
-
Активация колонки:
- Поместите спин-колонку в 2 мл пробирку для образцов
- Внесите 100 µl Активационного буфера в спин-колонку
- Центрифугируйте 30 секунд при 10 000 g
-
Загрузка колонок:
- Поместите в активированную спин-колонку смесь из шага 1.
- Центрифугируйте 30 секунд при 10 000 g
- Удалите отфильтровавшуюся жидкость
-
Отмывка колонки:
- Поместите загруженную ДНК спин-колонку в 2 мл. пробирку.
- Добавьте в спин-колонку 700 µl отмывочного буфера
- Центрифугируйте 30 секунд при 10 000 g и удалите отфильтровавшуюся жидкость
Необязательная вторичная отмывка колонки: рекомендуется только для ДНК > 200 п.н., если требуется высокоочищенная ДНК (для секвенирования, трансфекции и т.д.) - Добавьте в спин-колонку 700 µl отмывочного буфера
- Центрифугируйте 30 секунд при 10 000 g и удалите отфильтровавшуюся жидкость
- Центрифугируйте снова 2 минуты для удаления остатков отмывочного буфера
-
Элюция:
- Поместите спин-колонку в чистую 1,5 мл пробирку (не включена в комплект)
- Добавьте 30-50 µl элюционного буфера или бидистиллированной воды в центр мембраны колонки
- Выдерживайте при комнатной температуре 1 минуту
- Центрифугируйте 1 минуты при 10 000 g для элюции ДНК
Информация представлена исключительно в ознакомительных целях и ни при каких условиях не является публичной офертой
