Мечение белков и нуклеиновых кислот биотином/дестиобиотином обычно применяеттся для их последующей аффинной очистки в стрептавидин-агарозе, либо детекции
флуоресцентным или HRP-меченым стрептавидином. Из-за чрезвычайно высокой степени сродства биотина к стрептавидину (K
D = 10
-15 M), взаимодействие биотинилированных молекул со стрептавидином практически необратимо в физиологических условиях. Дестиобиотин связывается со стрептавидином в меньшей степени (K
D = 10
-11 M) и дестиобиотинилированные молекулы легко извлекаются из комплекса в присутствии биотина.
Азиды биотинилирующих реагентов могут быть помечены репортерными молекулами, содержащими терминальные или напряженные Алкины (например DBCO), в реакции медь-катализируемого (CUAAC) или безмедного облегченного напряжением (SPAAC) азид-алкинового циклоприсоединения.
Click Chemistry background information
Для использования с различными в молекулами и в различных условиях доступен ряд (дестио)биотинилирующих реагентов с
- различными характеристиками растворимости
(PEG-линкер для увеличенной растворимости)- оптимизированными характеристиками связываемости со стрептавидином
(различная длина PEG-линкера)- различные характеристики расслаиваимости (cleavability)
(Диазо-линкер для удаления биотиновой группы в процессе очистки)
Datasheet
