Каталог > Jena Bioscience > Молекулярная биология >
ПЦР (полимеразная цепная реакция) - широко используемый инструмент в современных биологических исследованиях, биотехнологии, диагностике. Он ежедневно применяется в лабораториях по всему миру для широкого круга задач, таких как генотипирование, анализ экспрессии генов, клонирование, секвенирование и т.д.
Jena Bioscience предлагает обширную линейку высококачественных продуктов и реагентов для ПЦР, успешно применяемых для исследовательских и прикладных целей. Различные формы поставки (готовые и лиофилизированные смеси и наборы для ПЦР) для всех разновидностей этого метода (классический, в реальном времени, с обратной транскрипцией, прямой, мультиплексный).
Сводная таблица по ПЦР в конце этой страницы позволит вам легко сориентироваться в разнообразии продуктов и реагентов и выбрать нужный раздел.
Ключевым элементом полимеразной цепной реакции является термостабильная ДНК-полимераза, осуществляющая амплификацию ДНК в фазе элонгации. Классическим ферментом для этой цели является Taq-полимераза, оптимальная для синтеза небольших фрагментов(до нескольких тысяч пар нуклеотидов) без повышенных требований к точности считывания и специфичности реакции.
В случаях, когда возможностей Taq-полимеразы недостаточно, Jena Bioscience предлагает воспользоваться другими вариантами:
1. Taq - классическая термостабильная полимераза с буфером, оптимизированным для минимизации побочных продуктов, совместимым с системами автоматического дозирования .
2. Taq high yield - комплектуется буфером с улучшенной эффективностью в более широком (по сравнению с Taq) диапазоне условий, в т.ч. обеспечивает более эффективное включение меченых и модифицированных нуклеотидов. Однако аммониевый буфер содержит детергенты, что может быть помехой для использования систем автоматического дозирования.
3. High Fidelity - высокопроцессивная (до 30 тыс.п.н.) полимераза повышенной точности.
4. Pfu-X - сверхточная полимераза.
5. Sequencing - мутант Taq полимеразы, для циклического секвенирования, способный в равной степени включать ddNTP и dNTP.
6. Hot Start - полимеразы с горячим стартом.
7. GreenMaster, Green - продукты c флуоресцентным неспецифическим красителем ДНК EvaGreen®
8. ProbesMaster, Probes - продукты для использования с зондом с двойной флуоресцентной меткой (TaqMan®, Molecular Beacons, FRET)
9. Red Load - продукты с инертным красным красителем для прямой загрузки продуктов ПЦР на гель.
10. ROX - продукты с референсным красителем, предназначенным для нормализации сигнала флуоресцентных красителей и зондов при количественной ПЦР. lowRox - низкая концентрация (50nM), highRox - высокая концентрация (500nM).
11. UNG - продукты с Урацил-ДНК-Гликозилазой для предотвращения переносимой контаминации.
12. Ab+ - продукты с Hot Start полимеразой, ингибированной антителами. Такое ингибирование более надежно, но антитела имеют животное происхождение и их наличие не всегда допустимо. В этом случае рекомендуется использовать обычную Hot Start полимеразу, ингибированную синтетическим аптамером.
Реагенты для ПЦР от Jena Bioscience
ПЦР (полимеразная цепная реакция) - широко используемый инструмент в современных биологических исследованиях, биотехнологии, диагностике. Он ежедневно применяется в лабораториях по всему миру для широкого круга задач, таких как генотипирование, анализ экспрессии генов, клонирование, секвенирование и т.д.
Jena Bioscience предлагает обширную линейку высококачественных продуктов и реагентов для ПЦР, успешно применяемых для исследовательских и прикладных целей. Различные формы поставки (готовые и лиофилизированные смеси и наборы для ПЦР) для всех разновидностей этого метода (классический, в реальном времени, с обратной транскрипцией, прямой, мультиплексный).
Сводная таблица по ПЦР в конце этой страницы позволит вам легко сориентироваться в разнообразии продуктов и реагентов и выбрать нужный раздел.
Виды ПЦР в линейке реагентов от Jena Bioscience
Классическая с анализом результата по конечной точке. Доступны несколько видов полимераз (см. ниже).
Для визуализации результатов ПЦР в гель-электрофорезе удобно использовать Red Load - смеси реагентов, содержащие инертный краситель для непосредственной загрузки в лунки геля, удобную и безопасную замену бромистому этидию.
- Количественная ПЦР с флуоресцентной детекцией в реальном времени (qPCR, Real-time PCR).
- GreenMaster, Green - продукты с неспецифическим интеркалирующим красителем ДНК EvaGreen® (аналогом SYBR Green и ему подобным).
- ProbesMaster, Probes - продукты для использования с зондом с двойной флуоресцентной меткой (TaqMan®, Molecular Beacons, FRET).
- Обратная транскрипция, в том числе совмещенная с полимеразной цепной реакцией (RT-PCR, ОТ-ПЦР) и с количественной ПЦР (RT-qPCR).
- Прямая ПЦР - реакция, использующая в качестве субстрата непосредственно биологические образцы (тканей, крови, плазмы и т.д.) без выделения ДНК.
- Мультиплексная ПЦР - амплификация нескольких цепей ДНК в одной реакции.
Формы поставки ПЦР-реагентов
Реагенты для ПЦР поставляются в нескольких формах, выбор которых обусловлен удобством работы с ними, хранения, спецификой стоящих перед вами задач:- Мастермиксы - готовые к применению смеси реагентов. Подготовка ПЦР с минимальными трудозатратами - требуется только добавить праймеры и ДНК-матрицу.
Лиофилизаты для ПЦР - сухие смеси реагентов, расфасованные в пробирки или 96-луночные планшеты. Не требуют замораживания, могут храниться при комнатной температуре.
- Наборы для ПЦР содержат отдельно полимеразу, реакционный буфер, нуклеотиды, раствор MgCl2. Обеспечивают максимальную гибкость, позволяя варьировать состав реакционной смеси, подбирая оптимальные условия реакции.
- Ферменты - поставляемые отдельно ферменты (Taq полимераза и другие), комплектуемые оптимизированным реакционным буфером.
Термостабильные полимеразы
Ключевым элементом полимеразной цепной реакции является термостабильная ДНК-полимераза, осуществляющая амплификацию ДНК в фазе элонгации. Классическим ферментом для этой цели является Taq-полимераза, оптимальная для синтеза небольших фрагментов(до нескольких тысяч пар нуклеотидов) без повышенных требований к точности считывания и специфичности реакции.В случаях, когда возможностей Taq-полимеразы недостаточно, Jena Bioscience предлагает воспользоваться другими вариантами:
- Полимеразы с горячим стартом (Hot Start) - обладают большей специфичностью и чувствительностью, особенно при работе с низкокопийными фрагментами при сложном фоне. Достигается это за счет пребывания ДНК-полимеразы в ингибированном состоянии на стадии подготовки реакции при комнатной температуре, когда возможное неспецифическое связывание праймеров способно негативно отразиться на точности реакции. Полимераза необратимо активируется при повышенной температуре в цикле начальной денатурации.
- Высокоточная полимераза (High Fidelity) - основанный на Taq-полимеразе комплекс, благодаря наличию корректирующей активности дающий прекрасные результаты при амплификации длинных (до 30 тыс.п.н.), GC-насыщенных и других сложных фрагментов. Точность считывания в 4 раза превышает таковую у Taq-полимеразы.
- Pfu-X полимераза - сверхточный фермент, уровень ошибок которого в 50 раз меньше Taq-полимеразы и в 2 раза меньше, чем у обычной Pfu-полимеразы.
- Сиквенсовая полимераза - мутантный фермент, позволяющий включать при амплификации как dNTP так и ddNTP. Применяется при циклическом секвенировании.
Буферы Crystal и Ruby
- Crystal Buffer - обеспечивает высокую специфичность и минимизирует количество побочных продуктов благодаря хорошо сблансированному соотношению ионов калия, аммония и магния. Теперь не требуется проводить пошаговую оптимизацию буфера.
- Ruby Buffer - дополнительно содержит загрузочный буфер и собственный красный краситель. Красный краситель обеспечивает простой визуальный контроль при постановке ПЦР и в сочетании с компонентами, регулирующими плотность раствора, прямое нанесение продуктов реакции на гель для электрофореза.
Продукция
Вы можете подобрать нужную вам позицию самостоятельно, перейдя по ссылкам ниже, либо обратиться к нашим специалистам:| Телефон: | +7(499)397-01-09 (10:00-18:00 MSK по рабочим дням) |
| e-mail: | info@sputnic-group.ru |
1. Taq - классическая термостабильная полимераза с буфером, оптимизированным для минимизации побочных продуктов, совместимым с системами автоматического дозирования .
2. Taq high yield - комплектуется буфером с улучшенной эффективностью в более широком (по сравнению с Taq) диапазоне условий, в т.ч. обеспечивает более эффективное включение меченых и модифицированных нуклеотидов. Однако аммониевый буфер содержит детергенты, что может быть помехой для использования систем автоматического дозирования.
3. High Fidelity - высокопроцессивная (до 30 тыс.п.н.) полимераза повышенной точности.
4. Pfu-X - сверхточная полимераза.
5. Sequencing - мутант Taq полимеразы, для циклического секвенирования, способный в равной степени включать ddNTP и dNTP.
6. Hot Start - полимеразы с горячим стартом.
7. GreenMaster, Green - продукты c флуоресцентным неспецифическим красителем ДНК EvaGreen®
8. ProbesMaster, Probes - продукты для использования с зондом с двойной флуоресцентной меткой (TaqMan®, Molecular Beacons, FRET)
9. Red Load - продукты с инертным красным красителем для прямой загрузки продуктов ПЦР на гель.
10. ROX - продукты с референсным красителем, предназначенным для нормализации сигнала флуоресцентных красителей и зондов при количественной ПЦР. lowRox - низкая концентрация (50nM), highRox - высокая концентрация (500nM).
11. UNG - продукты с Урацил-ДНК-Гликозилазой для предотвращения переносимой контаминации.
12. Ab+ - продукты с Hot Start полимеразой, ингибированной антителами. Такое ингибирование более надежно, но антитела имеют животное происхождение и их наличие не всегда допустимо. В этом случае рекомендуется использовать обычную Hot Start полимеразу, ингибированную синтетическим аптамером.
